期刊简介
本刊是由广西医科大学一附院主办,是中华医学会外科学会分会的外科学组的专业性期刊,杂志编辑委员会由全国著名的大肠肛门病外科专家组成。理论与实用并管,主要反映大肠肛门病外科临床领域在国内外取行的新进展、新技术、新方法,传递研究成果和理论知识。
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- 杂志名称:结直肠肛门外科杂志
- 主管单位:广西卫生厅
- 主办单位:广西医科大学
- 国际刊号:1674-0491
- 国内刊号:45-1343/R
- 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏
BALB/c鼠枯否细胞的分离培养与鉴定
张森;万德森;肖锡宾
关键词:枯否细胞(Kupffer Cell), 分离, 鉴定, BALB/c鼠
摘要:目的:肝脏是肿瘤转移的好发部位,而肝脏含有丰富的免疫细胞-枯否细胞(Kupffer Cell,KC).为研究枯否细胞的抗癌活性,旨在探讨BALB/c鼠枯否细胞的分离培养方法.方法:选用健康雄性8~10周龄BALB/c鼠,麻醉无菌取肝,注射冲洗去血并剪去部分结缔组织,小玻璃瓶中剪碎肝组织,加入0.04%的EDTA和0.05%链霉蛋白酶E溶液,交替轻轻吹打消化.不锈钢筛网滤过,用0.004% Dnase Ⅰ的1640液清洗细胞液,加Tris-氯化胺溶解红细胞.30%~70%Percoll梯度离心,10%FBS贴壁培养4~6 h洗去非贴壁细胞.通过对比体内、体外枯否细胞吞噬墨水和体外吞噬聚苯乙烯乳珠(latexbeads,D1.1μm)鉴定枯否细胞.结果:Kupffer细胞的得率为(7.57±1.92)×106个/鼠肝,即6.15×106个/g,贴壁率为40.18%.用0.4%台盼蓝染色鉴定,细胞存活率在95%以上,吞噬鉴定发现Kupffer细胞的纯度可达90%.贴壁Kupffer细胞的形态多样,可见不规则,多边形,多角伪足,典型的星形及多角形.体外培养枯否细胞存活2周后未见再有吞噬功能.结论:酶消化法结合梯度离心和贴壁培养是分离BALB/c鼠枯否细胞的可靠方法,为进一步实验打下了基础.
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